Rute dimulai dari Balai Kota Surakarta lalu melewati Keraton Surakarta, Pasar Klewer, Jembatan Keris, dan Masjid Raya Sheikh Zayed. Dari kota, peserta menuju timur ke Karanganyar melewati Waduk Gondang, Batu Jamus, Pasar Kemuning, hutan Ngargoyoso, dan kebun teh Kemuning.
Jalur Reguler menempuh sekitar 104 - 105 km dengan elevasi sekitar 1.100 m. Jalur Race menempuh 110 km dengan elevasi 1.400 - 1.500 m dan segmen KOM sepanjang 18 km. Kedua jalur berpisah di pit stop pertama dan bertemu lagi di pit stop kedua.